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        嚴防猴痘入侵!菲鵬生物快速PCR解決方案助力猴痘病毒精準檢測
        截至2022年6月27日,全球已有52個國家累計報道了4119例猴痘確診病例[1]。本輪疫情中,無論是病例數量的增長速度,還是波及范圍的擴張速度,均為非地方性流行區的歷史之最。上周新加坡、韓國和中國臺灣相繼出現了猴痘陽性病例,表明猴痘病毒已正式入侵亞洲。
        當地時間6月25日,世界衛生組織(WHO)宣布,現階段猴痘疫情不構成“國際關注的突發公共衛生事件”,但需控制疫情以防其進一步蔓延。保持高度警惕,及時準確地鑒別感染病例,防止境外輸入擴散,是當前全球猴痘疫情防控的重中之重。

        圖1.?2022年5月7日以來各國累計確診病例數和報告確診病例的國家數(圖源:參考資料1)


        01
        猴痘病毒介紹

        什么是猴痘病毒?

        猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)是一種全長約為197kb的雙鏈DNA病毒,屬于痘病毒科正痘病毒屬,是正痘病毒中對人類致病的4種病毒之一(其余3種為天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒)。
        猴痘病毒存在2個分支(西非分支和剛果盆地分支),其中西非分支病死率約為3%,剛果盆地分支病死率可達10%?[2]。近期,研究人員對2022年5月以來非地方性流行地區發現的猴痘病例樣本進行測序分析,結果顯示該病毒為較為溫和的西非分支。但令人擔憂的是,研究指出,此次暴發的猴痘病毒基因組與2018-2019年病毒基因組相比,平均增加了48個單核苷酸多態性位點(SNPs)[3],猴痘病毒的核苷酸變異程度遠超預期。



        圖2.?成熟的橢圓形猴痘病毒體(左)和球形未成熟病毒體(右)電子顯微鏡圖像(圖源:Centers for Disease Control and Prevention (cdc.gov))

        猴痘病毒的臨床癥狀
        在臨床癥狀上,猴痘的感染癥狀與天花相似,但猴痘的臨床癥狀較輕,潛伏期5-12天,多為6-13天?;颊甙l病初期表現為發熱、頭痛、淋巴結腫大、肌肉酸痛、重度疲乏等癥狀,之后會引起面部和身體的皮疹。猴痘為自限性疾病,患者通常會在兩到三個星期內自行康復;但對于兒童、孕婦或由于其他健康狀況而免疫抑制的人來說,猴痘可能會導致其他繼發性感染,如肺炎、敗血癥和腦炎等嚴重疾病。

        圖3.?患者感染猴痘癥狀(圖源:世界衛生組織網站)

        猴痘病毒的傳播途徑

        猴痘是一種病毒性人畜共患病,可通過密切接觸由動物傳染給人。研究人員在對猴痘的研究和治療中發現,多年來猴痘病毒的基本傳染數R0值一直小于1,表明猴痘病毒傳染力弱,病源會逐漸減少直至停止傳播。

        然而,本輪猴痘疫情是不同以往的,病例數和波及范圍均增長較快。2022年5月以來,一些非地方性流行地區的國家先后發現大量猴痘病例,且已出現人際間傳播。目前研究發現,病毒經黏膜和破損的皮膚侵入人體。人主要通過接觸感染動物病變滲出物、血液、其它體液,或被感染動物咬傷、抓傷而感染。人與人之間主要通過密切接觸傳播,也可通過飛沫傳播,接觸被病毒污染的物品也有可能感染,還可通過胎盤垂直傳播。尚不能排除性傳播?[2]。

        猴痘病毒的預防和診斷方法
        目前國內尚無特異性抗猴痘病毒的藥物,主要是對癥支持治療和并發癥的治療,因此做好猴痘預防是關鍵。WHO數據顯示,天花疫苗對猴痘病毒的有效性高達85%,然而,全球在1980年左右消滅天花之后便停止了天花疫苗的接種,可見大量人群仍是猴痘病毒的易感人群。

        要想阻止猴痘病毒進一步成為威脅人類的病原體,積極發現病例從而打破傳播鏈至關重要。關于猴痘的鑒別診斷,WHO在《Laboratory testing for the monkeypox virus (Interim guidance)》中推薦優先使用猴痘病毒特異性real-time PCR或痘病毒通檢方法對疑似樣本進行檢測[4]。此外,國家衛健委在《猴痘診療指南(2022年版)》中指出以猴痘病毒核酸檢測陽性或培養陽性作為確診的依據[2]。由此可見,PCR方法能夠特異性地快速檢測出猴痘病毒DNA,是早期識別并快速鑒定猴痘的良好工具。


        02
        菲鵬生物快速PCR解決方案
        助力猴痘病毒精準檢測

        為有效應對猴痘疫情,國內外眾多IVD企業積極響應,推進猴痘病毒相關檢測產品的研發和上市。菲鵬生物作為全球體外診斷核心原料及試劑解決方案的供應商之一,時刻密切關注猴痘疫情的發展,并結合自身的產品和技術特點,現推出猴痘病毒核酸快速PCR檢測方案,期望助力猴痘病毒感染的高效現場化鑒別,第一時間控制病毒的輸入和擴散。

        ??圖4. 菲鵬生物猴痘病毒核酸快速PCR檢測方案

        菲鵬生物基于其高效核酸提取系統和快速PCR技術平臺,打造了一套全流程控制在30min以內的“核酸提取純化+PCR擴增”的解決方案,具體組成如下:




        ?核酸提取

        1.?病毒DNA/RNA快速提取試劑(磁珠法)

        (Cat. No. RK1011/RK1012)

        • 適用樣本類型:拭子類樣本

        • 提取步驟:

        • 搭配提取儀運行時長:9.5-13min(提取設備不同,運行速度有所差異)


        2.?自動化核酸提取儀

        平臺及其特點

        RI1501

        RI1502

        RI1503

        最大樣本通量/個

        32

        16

        10

        可處理樣本體積/μL

        20-1000?

        20-1000

        50-5000

        配套耗材

        96孔板+磁棒套

        96孔板+磁棒套

        單試劑條+磁棒套

        或單試劑條+磁棒套

        運行時長(搭配RK1011/RK1012)/min

        13

        9.5

        12.5

        設備尺寸(W*D*H)/cm3

        43×42×38.5

        20.8×25.8×31.5

        34×35×41




        ?PCR擴增

        1.?P810實時熒光定量PCR分析儀


        • 超快循環:可在8min內完成95-60℃ 40個變溫循環+信號采集

        • 靈活方便:一批8管測試,小批量靈活安排,結果立等可取

        • 經典通用:主流4通道設計,兼容常規qPCR探針染料

        • 簡便易用觸屏控制,界面簡潔友好易上手;即裝即用,無需校準,除簡單清潔外無需特別維護


        2.?核酸檢測試劑

        產品

        猴痘病毒通用型核酸檢測試劑

        猴痘病毒分型酸檢測試劑

        猴痘病毒通用型及分型、水痘病毒核酸檢測試劑

        產品特點

        雙拷貝基因設計、高靈敏度;超快速擴增

        雙拷貝基因設計,高靈敏度;超快速擴增;可實現通用型與剛果分支型、西非分支型分型

        猴痘病毒雙拷貝基因設計,可以實現猴痘病毒、水痘病毒快速檢測與分型

        產品形式

        液態試劑

        或全混凍干試劑(8聯管/西林瓶)

        適配機型

        P810及ABI7500、羅氏480、宏石、博日、天隆等經典PCR平臺

        檢測靈敏度

        100-250 copies/mL

        (注:搭配不同提取平臺不同上樣體積,可實現不同的靈敏度水平)

        運行時長

        搭配P810:擴增時長15min

        搭配ABI7500/SLAN等:擴增時長40min

        3.?快速DNA聚合酶 UltraFast Start DNA Polymerase

        高效快速合成,可適用于常規實時熒光定量PCR,也可適用于P810快速熒光定量PCR平臺,產品可提供常規形式及可凍干的無甘油形式。



        ?整體解決方案

        方案1:病毒DNA/RNA快速提取試劑(磁珠法)+P810實時熒光定量PCR分析儀+全混凍干試劑


        圖5. 檢測不同濃度梯度(分別是2.5*107、2.5*106、2.5*105、2.5*104、2500、250 copies/mL)的猴痘質粒樣本,擴增呈良好的線性關系,靈敏度高。



        方案2:病毒DNA/RNA快速提取試劑(磁珠法)+宏石/ABI7500+全混凍干試劑


        圖6. 檢測不同濃度梯度(分別是5*106、5*105、5*104、5000、500 copies/mL)的猴痘質粒樣本,擴增呈良好的線性關系,靈敏度高。


        03
        疫情防控,菲鵬生物一直在行動!

        新冠未去,猴痘又襲,面對復雜嚴峻的疫情態勢,菲鵬生物憑借其在IVD試劑核心原料領域沉淀多年的技術和經驗,延伸推出了試劑解決方案和開放儀器平臺,形成了全面的產品線布局,為抗擊全球疫情保駕護航。菲鵬生物期望通過持續的創新與服務,實時追蹤疫情發展趨勢,與全球客戶伙伴攜手,共克時艱,共創未來。

        如您對猴痘病毒核酸快速PCR檢測方案感興趣或有疑問,歡迎隨時與菲鵬生物聯系,謝謝!

        電話:0769-86089888

        郵箱:marketcn@fapon.com


        參考資料:

        [1]?Global health?-?Monkeypox 2022 global epidemiology; Report 2022-06-27?(https://www.monkeypox.global.health)

        [2] 國家衛生健康委《猴痘診療指南 (2022年版)》

        [3]?Investigation into monkeypox outbreak in England: technical briefing 1 - GOV.UK (www.gov.uk)

        [4]?WHO:Laboratory testing for the monkeypox virus: Interim guidance

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